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新品推薦:嗜肺巴斯德桿菌PCR試劑盒

發(fā)布時間:2024/11/8 8:53:30      閱讀次數(shù):154

產(chǎn)品及特點

嗜肺巴斯德桿菌PCR試劑盒可用于檢測嗜肺巴斯德桿菌.嗜肺巴斯德桿菌(Pasteurella pneumophila)在自 然界中分布廣泛,它有兩種生物型,主要感染嚙齒類動物,對實驗小鼠 大鼠和豚鼠的危 害較大.嗜肺巴斯德桿菌作為一種條件致病菌,能夠引起免疫缺陷動物或免疫功能低下的 動物產(chǎn)生嚴重的肺炎,并可能導(dǎo)致動物死亡.本產(chǎn)品是根據(jù) PCR 原理開發(fā)的嗜肺巴斯德 桿菌檢測試劑盒,它具有下列特點:

1.   即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板.

2.   提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品.

3.   產(chǎn)品精心優(yōu)化且特異性高,引物是根據(jù)嗜肺巴斯德桿菌 DNA 高度保守區(qū)設(shè)計, 不會跟除此之外的其它生物樣本 DNA 發(fā)生交叉反應(yīng).

4.   PCR mix 中含上樣染料,擴增反應(yīng)后可以直接上樣電泳.

5.   嗜肺巴斯德桿菌PCR試劑盒足夠 50  20μL 體系的PCR 反應(yīng).

6.   本產(chǎn)品只能用于定性實驗,不能用于定量.

7.   本產(chǎn)品只能用于科研.


成分規(guī)格

 

產(chǎn)品組成

編號

規(guī)格

2×Taq PCR Master Mix

GZ020101

550 μL

DEPC-H2O

GZ070401

1 mL

嗜肺巴斯德桿菌 PCR 引物混合液

GZ01345668yw

60 μL

嗜肺巴斯德桿菌 PCR 陽性對照

(1×10E5  拷貝/μL)

 

GZ01345668pc

 

50 μL

 

 

保存條件

低溫運輸,-20保存,保存期限為一年.陽性對照需要單獨放置,不要污染其他試 劑.

使用方法

DNA 提取(樣本制備區(qū))

1.  (選做)如果有 N 個樣品,必須設(shè)置 N+2 個提取反應(yīng),多出的兩個中一個是 PC (樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照).可以用 10μL 嗜肺巴斯德桿菌 PCR 陽性對照(1×10E5 拷貝L,本試劑盒提供)再加上一定量的水作為制備的陽性對 照(加水后其總體積跟樣品一樣,樣品體積多少取決于所用試劑盒的要求).可以用水  作為制備的陰性對照.

2.  用自選方法提取純化樣品 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼 容.建議使用細菌基因組 DNA 提取試劑盒(Cat:  GZ01201-50)提取 DNA.

二 試劑配制(試劑準備區(qū))

準備足量的 PCR 管(樣品管 陰性對照管 陽性對照管),向各 PCR 管中分別加入 下列成分.

成分

N 

待檢樣品管

PCR

陰性對照

PCR

陽性對照

2×Taq PCR Master Mix

 10 μL

10 μL

10 μL

嗜肺巴斯德桿菌 PCR 引物混合液

 1 μL

1 μL

1 μL

DEPC-H2O

7 μL

7 μL

7 μL

轉(zhuǎn)移至模板添加區(qū).

三 添加模板(模板添加區(qū))

 PCR 管中分別加入 2uL 模板,順序為陰性對照DEPC-H2O) 待測樣品模板  嗜肺巴斯德桿菌 PCR 陽性對照,離心 30 秒,立即進行擴增反應(yīng).

四 擴增反應(yīng)(擴增及產(chǎn)物分析區(qū))

 PCR 管放置在 PCR 擴增儀器樣品槽相應(yīng)位置,進行擴增,擴增程序如下:

 

過程

溫度

時間

預(yù)變性

95

3 min

 

PCR 反應(yīng)   35 個循環(huán))

95

15 sec

55

15 sec

72

15 sec

最后延伸

72

5 min

五 電泳檢測

 5-10 μL PCR 產(chǎn)物.電泳檢測 PCR 產(chǎn)物.本產(chǎn)品提供的 Taq PCR Master Mix  染料,在擴增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer.

嗜肺巴斯德桿菌PCR試劑盒樣本檢測結(jié)果:凝膠電泳圖譜中有 374-377bp 條帶,表明該樣本含有嗜肺巴斯德桿 菌,結(jié)果為陽性;無 374-377bp 條帶,該樣本不含嗜肺巴斯德桿菌,結(jié)果為陰性.


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